垂直电泳槽染色与脱色注意

更新时间：2020-05-12

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垂直电泳槽是一种与圆盘电泳槽在原理与结构上略有相似，却在制胶和电泳方面存在某些差异的电泳槽种类中的一种。它一般被应用于分子生物学等领域。由于垂直电泳槽在使用过程中的要求较高，所以在使用时应当注意以下几点：

分离胶浓度的选择。低浓度胶对大分子量蛋白质分离效果好：高浓度胶对小分子量蛋白质分离效果好；

清洗玻璃板。玻璃板应清洗干净，玻璃表面的油污会造成分离胶与浓缩胶界面的不平整。经用去污剂洗涤后的玻璃板先用蒸馏水冲洗，再用纱布蘸乙醇擦拭玻璃表面；

TEMED的加入量。TEMED是促进丙烯酰胺聚合的加速剂。加*果随试剂保存时间而变化。对于陈旧试剂，可适当多加。事实上，配制分离胶时每块胶板按2滴加入，效果也不错；

丙烯酰胺的毒性。丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺都是神经性毒剂，对皮肤有刺激作用。但在形成凝胶后则无毒。操作时应戴橡胶或塑料手套，尽量避免接触皮肤，并注意实验后洗手；

电极缓冲液的配制。电极缓冲液的用量大、占体积、配制麻烦。如果经常跑胶，可考虑配制5X浓度的浓缩液。方法如下：将144g甘氨酸和30﹒2gTris溶于1升蒸馏水中。使用时稀释5倍。